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    生物緩沖液的配置及保存方法
    更新時(shí)間:2019-08-06   點(diǎn)擊次數(shù):3896次
       PBS是磷酸緩沖鹽溶液(phosphate buffer saline)一般作為溶劑,起溶解保護(hù)試劑的作用。它是生物化學(xué)研究中使用為廣泛的一種生物緩沖液,主要成分為Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl,由于Na2HPO4和KH2PO4它們有二級(jí)解離,緩沖的pH值范圍很廣;而NaCl和KCl主要作用為增加鹽離子濃度。如有需要PBS還可以補(bǔ)加1 mmol/L CaCl2和0.5 mmol/L MgCl2,以提供雙價(jià)陽(yáng)離子。

      PBS是磷酸緩沖鹽溶液的簡(jiǎn)稱,不僅偽狂犬病毒要用它稀釋,一般的有活性的生物制劑都要用它來(lái)稀釋。

      原因就是它具有鹽平衡、可調(diào)整的適宜pH緩沖作用,蒸餾水不具有鹽平衡作用,可以破壞生物蛋白的結(jié)構(gòu)及生物特性;生理鹽水不具有調(diào)整pH的作用,對(duì)完整的、具有活性的物質(zhì)不能保證其在適條件下參與生物反應(yīng),所以使用PBS是。

      PBS也不是的,有的生物活性物質(zhì)需要的條件比PBS還要高,就需要在平衡緩沖液中加入更多的成分,維持的條件保證生物活性物質(zhì)保持其完整的特性。

      生物緩沖液的配制方法

      1.含0.05%吐溫-20的pH7.4的磷酸鹽緩沖液(簡(jiǎn)稱為PBS-T)配制方法為:

      2.稱取磷酸二氫鉀(KH2PO4),磷酸氫二鈉(Na2HPO4·12H2O),氯化鈉(NaCl),(KCl),吐溫-20 ,加水。

      3.PBS:Phosphate Buffered Saline

      4.PBS 1L配方pH7.4:

      5.磷酸二氫鉀(KH2PO4):0.24g,

      6.磷酸氫二鈉(Na2HPO4):1.44g,

      7.氯化鈉(NaCl):8g,

      8.(KCl):0.2g,

      9.加去離子水約800mL充分?jǐn)嚢枞芙猓缓蠹尤霛恹}酸調(diào)pH至7.4,后定容到1L

      保存方法

      加去離子水約800mL充分?jǐn)嚢枞芙猓缓蠹尤霛恹}酸調(diào)pH至7.4,后定容到1L。高溫高壓滅菌后置于4攝氏度冰箱保存待用。

      PBS緩沖液(pH7.2~7.4):

      KH2PO42mM

      Na2HPO4 8mM

      NaCl 136mM

      KCL 2.6mM

      PBS緩沖液一般作為溶劑,起溶解保護(hù)試劑的作用,具體試劑一般也有不同的比例配方,在針對(duì)性上就有了更好的效果。

      1x PBS緩沖液就是0.01M的磷酸鹽緩沖液,可直接使用。2x PBS就是2倍濃度,使用時(shí)稀釋一倍使用。0.1M的PBS一般不用來(lái)配置緩沖液,用于其它用處。

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