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    福爾根DNA染色液
    更新時間:2016-05-12   點擊次數:3015次

    福爾根DNA染色液

    產品簡介:

    脫氧核糖核酸(DNA)染色方法有Feulgen法、甲基綠-派洛寧法、吖啶橙熒光法等,其中zui經典的是Feulgen,該法是一種經典的酶組織化學法。

    NobleRyder Feulgen Stain 原理在于DNA經溫和的弱酸(例如鹽酸)水解后,嘌呤堿與脫氧核糖間的糖苷鍵被打開,并且使脫氧核糖與磷酸間的磷酯鍵斷開,在脫氧核糖的一端形成游離的醛基。醛基在原位與 Schiff試劑結合,形成紫紅色化合物,使細胞內含有DNA的部位呈紫紅色。紫紅色的產生是因為反應產物的分子內有醌基(醌基是一個具有顏色的發色團,所以凡含有DNA的部位就呈紫紅色。該水解作用不影響核糖-嘌呤結合鍵,因此RNA用此法處理后則分解,所以該法不適用于證明RNA

    產品組成

    編號

    名稱

    D6610

    3×50ml

    Storage

    試劑(A):Schiff Reagent

    50ml

    4℃ 避光

    試劑(B):

    SO2

    B1:弱酸溶液

    50ml

    RT

    B2:亞硫酸鹽溶液

    50ml

    RT

    使用說明書

    1

         

    自備材料:

    1、蒸餾水、

    2、恒溫箱

     

    操作步驟(僅供參考)

    ()石蠟切片染色:

    1、組織固定:Carnoy固定石蠟切片較好,10%福爾馬林亦可,不宜采用Bouin固定液。

    2、配制弱酸工作液:按弱酸溶液:蒸餾水=1:4配制,即取1份弱酸溶液、4份蒸餾水,充分混合,即獲得弱酸工作液。

    3、石蠟切片脫蠟至蒸餾水。

    4、入弱酸工作液,室溫浸洗一下。

    5、切片入預熱至60℃的弱酸工作液,孵育8min。

    6、切片入室溫的弱酸工作液中沖洗1min。

    7、蒸餾水沖洗。

    8、切片入Schiff Reagent,室溫避光染色30~60min。

    9、在上述染色過程中,配制SO2水工作液。按弱酸溶液:亞硫酸鹽溶液:蒸餾水=1:5:94 配制,即取弱酸溶液1份、亞硫酸鹽溶液5份、蒸餾水94份,充分混合,即配即用。

    10、用新鮮配制的SO2水工作液洗切片3次,每次90s。

    11、蒸餾水中洗凈。經系列乙醇脫水。二甲苯透明并封片。

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